Preguntas frecuentes sobre el desarrollo de anticuerpos monoclonales de conejo
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Esta publicación de blog fue escrita por AvantGen, una CRO de biotecnología pionera dedicada a acelerar las terapias basadas en anticuerpos, así como a proporcionar reactivos críticos y anticuerpos de diagnóstico a la comunidad de investigación. En esta publicación de blog, AvantGen responde preguntas frecuentes sobre su servicio ofrecido continuamente desde hace más tiempo: el desarrollo de anticuerpos monoclonales de conejo. Para obtener más información sobre AvantGen y su trabajo innovador, visite www.avantgen.com.
1. ¿Por qué utilizar anticuerpos de conejo en lugar de anticuerpos de ratón?
Los anticuerpos de conejo ofrecen varias ventajas sobre los anticuerpos de ratón. En primer lugar, los conejos producen un repertorio más diverso de anticuerpos debido a su sistema inmunológico más grande y a su capacidad de sufrir conversión genética, lo que conduce a anticuerpos con una especificidad y afinidad mucho mayores. Además, los anticuerpos de conejo reconocen epítopos que pueden no ser inmunogénicos en ratones, lo que los hace adecuados para objetivos que dificultan la generación de anticuerpos en ratones. Además, la distancia evolutiva entre conejos y humanos da como resultado anticuerpos de conejo que a menudo muestran una reactividad cruzada superior a los antígenos humanos, lo que los convierte en herramientas valiosas para la investigación y el diagnóstico. Esto puede deberse en parte al hecho de que la mayoría de las cepas de ratones utilizadas son endogámicas, lo que en general provoca respuestas inmunitarias menos diversas. Una comparación directa de anticuerpos anti-ratón derivados de conejo utilizados en tinción inmunohistoquímica (IHC) mostró una sensibilidad consistentemente mayor que los mAb de conejo.1
2. ¿Cuáles son las aplicaciones de los anticuerpos monoclonales de conejo?
Los anticuerpos monoclonales de conejo tienen una amplia gama de aplicaciones en diversos campos de la investigación y el diagnóstico. Se utilizan comúnmente en técnicas como inmunohistoquímica, transferencia Western, citometría de flujo, inmunoprecipitación, ELISA y análisis ChIP. Además, a menudo se utilizan para detectar fármacos de moléculas pequeñas y grandes en estudios farmacocinéticos o como paso crítico en la fabricación y control de calidad de productos biológicos.
3. ¿Cómo se generan los anticuerpos monoclonales de conejo?
Los anticuerpos monoclonales de conejo contra un objetivo específico generalmente se generan en un proceso de dos pasos: inmunización y detección de anticuerpos. Los conejos se inmunizan con el objetivo específico en forma de una pequeña molécula, péptido, proteína, ADN/ARN o células. A menudo se utilizan adyuvantes, conjugados y/o vehículos para estimular la respuesta de anticuerpos del animal. Los animales suelen recibir refuerzos posteriores para provocar una respuesta inmunitaria sólida. El suero extraído de animales se puede medir en busca de anticuerpos específicos del objetivo y se puede utilizar para determinar el momento apropiado para recolectar células B secretoras de anticuerpos para su detección. Hay múltiples métodos disponibles para la detección, incluidos hibridomas, células B individuales y tecnologías de presentación en fagos y levaduras para identificar anticuerpos monoclonales específicos. El éxito de las pruebas de detección, especialmente en la identificación de anticuerpos monoclonales raros que se unen a un epítopo único, a menudo se reduce a dos cosas: el tamaño del tubo y la capacidad de encontrar esa aguja. Teniendo en cuenta la velocidad y el costo, las diferentes tecnologías tienen diferentes eficiencias.
4. ¿Dónde puedo encontrar anticuerpos de conejo de alta calidad para mi investigación?
Se pueden obtener anticuerpos de conejo de alta calidad de proveedores comerciales acreditados. En particular, algunas organizaciones de investigación por contrato (CRO, por sus siglas en inglés) tienen experiencia en la generación de anticuerpos monoclonales de conejo contra objetivos personalizados o novedosos. AvantGen tiene una larga trayectoria proporcionando mAb de conejo de alta calidad a la comunidad de investigación, incluidas entidades terapéuticas, de diagnóstico, sin fines de lucro y gubernamentales para diversas aplicaciones. Al combinar protocolos de inmunización patentados con un sistema de visualización de levadura novedoso y robusto, se puede identificar uno entre un millón de anticuerpos ultraespecíficos, discriminando a menudo entre un solo aminoácido, una modificación postraduccional o un resto químico en la molécula objetivo. AvantGen también produce anticuerpos monoclonales de conejo en forma recombinante con secuencias conocidas. Además, la posible actividad de unión a FcRn del dominio Fc de conejo se puede eliminar para reducir la actividad de unión de fondo en diversos ensayos basados en células, tales como IHC y citometría de flujo. Para obtener más información sobre la plataforma y los servicios AvantBunny de AvantGen, comuníquese con partner@avantgen.com o conéctese a través del enlace Scientist.com a continuación.
5. Y por último, ¿alguna recomendación para un libro infantil sobre conejos?
El conejo de pana de Margery Williams. Para niños y adultos por igual. ¡Disfrutar!
Referencias
- Weber J, Peng H, Rader C. Desde repertorios de anticuerpos de conejo hasta anticuerpos monoclonales de conejo. Exp. Mol Med. 24 de marzo de 2017;49(3). PMID: 28336958.